番鸭细小病毒VP3基因在昆虫细胞中的表达与鉴定

作者：吴萌; 朱善元; 吴海涛; 张继玲; 王安平^*

来源：江苏农业科学, 2018, 46(21): 58-60.

DOI：10.15889/j.issn.1002-1302.2018.21.013

• 番鸭细小病毒
• VP3基因
• 杆状病毒表达系统
• 转染
• sf9细胞

为使番鸭细小病毒VP3基因在昆虫细胞中正确表达,根据已发表的该病毒的VP3基因序列设计1对引物。以PCR方法扩增VP3基因;构建转移载体p Fast Bac1-VP3,转化DH10Bac感受态细胞,得到重组Bacmid DNA;转染昆虫细胞Sf9,获得重组杆状病毒r Bac-VP3。通过间接免疫荧光、Western-blot试验、SDS-PAGE分析目的片段在昆虫细胞中的表达情况。成功构建了转移载体p Fast Bac1-VP3,获得重组杆状病毒r Bac-VP3,VP3基因在杆状病毒表达系统中成功表达,得到大小约58 ku的蛋白。

• 单位
  江苏农牧科技职业学院