长链非编码RNA NORAD抑制人脐静脉内皮细胞的血管生成

作者：张莹; 杨阳; 陈维娜; 米辰炀; 万叔坤; 王晓庆; 张慧东^*

来源：现代预防医学, 2023, 50(05): 933-939.

DOI：10.20043/j.cnki.MPM.202211088

• 长链非编码RNA NORAD
• 人脐静脉内皮细胞
• 血管生成
• VEGFA和FOXP3
• 女性不良妊娠

目的 探究长链非编码RNA中DNA损伤激活的非编码RNA(non-coding RNA-activated by DNA damage,NORAD)对人脐静脉内皮细胞血管生成的影响和机制。方法 本文以人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cell,HUVEC）为研究对象，采用小干扰RNA和过表达质粒分别转染细胞24 h，采用逆转录-实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和免疫印迹实验（western blot,WB）检测mRNA和蛋白水平。染色质免疫沉淀技术（ChIP）检测转录因子FOXP3(forkhead box P3)在血管形成关键蛋白VEGFA(vascular endothelial growth factor A)启动子区的结合情况。血管生成实验检测HUVEC血管生成功能。采用两独立样本t检验或单因素方差检验法进行数据分析。结果 在HUVEC中过表达NORAD后（增加57.96倍，t=68.761,P<0.001）,VEGFA和FOXP3的mRNA水平分别上调2.96倍（t=8.942,P=0.001）和2.23倍（t=7.372,P=0.002），其蛋白水平分别上调1.78倍（t=12.834,P<0.001）和1.97倍（t=30.391,P<0.001）。FOXP3在VEGFA的启动子区的结合量是对照组的3.36倍（t=6.232,P=0.003）。在过表达FOXP3后（增加至57.73倍，t=14.152,P<0.001）,VEGFA的mRNA及蛋白水平分别上调3.80倍（t=14.421,P<0.001）和1.42倍（t=10.212,P<0.001）。过表达NORAD后HUVEC血管形成功能增强。结论 NORAD促进转录因子FOXP3表达进而促进VEGFA转录和蛋白表达，增强了内皮细胞血管生成功能，提示NORAD可能作为预防由血管生成功能障碍而引发的妊娠相关疾病的重要调控分子。

• 单位
  公共卫生学院; 四川大学; 中山大学附属第八医院