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摘要
目的: 探讨激活素A(ACTA)/抑制素A(INHA)在LH峰效应的表皮生长因子(EGF)信号通路中的作用机制。方法: ①经孕马血清促性腺激素(PMSG)预处理后48 h, 取小鼠卵丘-卵母细胞复合物(COCs), 随机置入含0 μg/L、5 μg/L、10 μg/L、20 μg/L EGF的体外成熟体系中进行体外成熟(IVM)培养, 2 h后收集卵丘颗粒细胞, 进行Real-time PCR(RT-PCR)检测各组颗粒细胞中ACTβA亚基, ACTR Ⅱ、INHα亚基的表达水平。②上述体外培养体系中加入表皮生长因子受体(EGFR)的强抑制剂AG1478后, 检测各组颗粒细胞中ACTβA亚基、ACTR Ⅱ、INHα亚基的表达水平。③COCs分别置入含10 μg/L EGF的体外成熟体系中1 h、2 h、3 h、4 h, 进行IVM培养, 收集卵丘颗粒细胞, 提取RNA, 用RT-PCR检测各组颗粒细胞中ACTβA亚基、ACTR Ⅱ、INHα亚基的表达水平。结果: ①EGF可刺激小鼠卵丘颗粒细胞ACTβA亚基的表达, 抑制INHα亚基的表达, 而对ACTRⅡ型受体mRNA的表达无明显影响。② EGF对ACT/INHβA亚基的促进作用以及对INHα亚基的抑制作用具有时效性, 在作用后2 h达到最强, 随后逐渐减弱。③ EGF对ACT/INHβA亚基的促进作用以及对INHα亚基的抑制作用具有剂量依赖性, 10 μg/L时的作用效力最强。结论: 说明ACTA/INHA是卵巢内部EGF网络的下游信号分子, 而EGF对两者具有不同的调控方向, 并呈现显著的时间依赖性和剂量依赖性。
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