摘要
为探究中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular trap, NET)对乳腺癌增殖、侵袭的影响及其相关机制,对临床患者肿瘤和癌旁组织进行环状RNA(circular RNA, circRNA)芯片检测,并使用qRT-PCR进行验证;采用免疫组化法检测组织中淋巴细胞抗原6复合物(lymphocyte antigen 6 complex, ly6g)和中性粒细胞弹性蛋白酶(neutrophil elastase, NE)的表达情况;分离外周血多形核中性粒细胞(polymorphonuclear neutrophil, PMN),刺激形成NET,将纯化后的NET与乳腺癌细胞系MCF7共孵育,通过脂质体将si-circRNA_0080220转染至MCF7细胞,采用qRT-PCR检测circRNA_0080220和miR-1271的表达变化;通过CCK-8、细胞划痕和Transwell试验检测MCF7细胞增殖、迁移和侵袭的变化;利用双荧光素酶报告试验检测circRNA_0080220与miR-1271的相关性。结果显示,乳腺癌患者肿瘤部位的ly6g和NE表达水平高于癌旁组织;肿瘤组织和癌旁组织共有1 023个差异circRNA,其中circRNA_0080220表达差异较大;在体外试验中,NET刺激MCF7细胞后能上调circRNA_0080220表达,并促进其增殖、迁移和侵袭(P<0.001);沉默circRNA_0080220可有效拮抗NET对MCF7的促增殖及侵袭作用(P<0.01); circRNA_0080220能够靶向抑制miR-1271表达;在乳腺癌组织中,miR-1271的表达水平较癌旁组织显著降低(P<0.01)。该研究提示,circRNA_0080220具有miR-1271的分子海绵功能;NET通过上调乳腺癌circRNA_0080220的表达促进肿瘤细胞的增殖和侵袭。
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单位衡水市人民医院; 河北医科大学第四医院