半枝莲醇提取物调控circ＿0092283/miR-198对结直肠癌细胞克隆形成和凋亡的影响

作者：刘明胜^*; 陈文超; 蔡颖畅

来源：中国药师, 2021, 24(09): 1606-1611.

DOI：10.19962/j.cnki.issn1008-049X.2021.09.004

• 半枝莲醇提取物
• 结直肠癌
• circ＿0092283
• miR-198
• 克隆形成
• 凋亡

目的:探讨半枝莲醇提取物(EESB)对结直肠癌细胞HCT-116克隆形成和凋亡的影响及可能机制。方法:HCT-116细胞分为不同剂量(0,200,400,800μg·ml-1)EESB组、circ0092283小干扰RNA(si-circ0092283)组、小干扰RNA阴性对照(si-NC)组、400μg·ml-1 EESB+circ0092283过表达载体(pcDNA-circ0092283)组、400μg·ml-1EESB+miR-198抑制剂(anti-miR-198)组,克隆形成实验检测细胞克隆形成能力,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白质印迹(Western Blot)法检测细胞中B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(Bax)蛋白表达,实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测circ0092283和miR-198表达。收集30例结直肠癌患者的癌组织和癌旁组织,培养HCT-116和肠上皮细胞HIEC-6,RT-qPCR法检测组织和细胞中circ0092283和miR-198表达水平。双荧光素酶报告基因实验验证circ0092283和miR-198调控关系。结果:不同剂量(200,400,800μg·ml-1)的EESB作用于HCT-116细胞或干扰circ0092283表达后,HCT-116细胞克隆形成数和细胞中Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05),细胞凋亡率和细胞内Bax蛋白表达升高(P<0.05)。结直肠癌组织和HCT-116细胞中circ0092283呈高表达,而miR-198呈低表达。circ0092283靶向负调控miR-198。EESB抑制circ0092283表达,而促进miR-198表达;过表达circ0092283或抑制miR-198表达可降低EESB对HCT-116细胞克隆形成、细胞凋亡和Bal、Bax蛋白表达的影响。结论:EESB可能通过调控circ0092283/miR-198轴降低结直肠癌HCT-116细胞的克隆形成能力,并促进HCT-116细胞凋亡。

• 单位
  衢州市人民医院