猪繁殖与呼吸综合征病毒一步多重RT-PCR检测方法的建立及应用

作者：吴锦艳; 田宏; 尚佑军; 陈妍; 魏衍全; 侯相民; 赵娜; 何建辉; 刘湘涛

来源：畜牧兽医学报, 2011, (10): 1485-1490.

• 猪繁殖与呼吸综合征病毒
• 一步多重RT-PCR
• 检测方法 porcine reproductive and respiratory syndrome virus(PRRSV)
• one step multiplex RT-PCR
• detection method

本研究旨在建立猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的一步多重RT-PCR检测方法。通过多序列比对以及反应条件的优化,从4对引物中精选了3对特异性和敏感性较好、扩增片段分别为228、345和490bp的引物,并应用所建立的方法对4种分离株的细胞毒和组织毒、田间样品及临床症状相似的疾病猪瘟和猪伪狂犬病毒做了检测;并对田间及实验室样品进行符合率试验,对阳性样品进行重复性试验。与常规RT-PCR法进行比较,证明该方法比常规RT-PCR法敏感性提高了10倍;而且利用该方法可使检测时间大大缩短;特异性试验证实该方法无交叉反应;阳性和阴性样本的符合率均为100%;3次阳性样品重复性检测结果完全相同;稳定性试...

• 单位
  中国农业科学院兰州兽医研究所; 家畜疫病病原生物学国家重点实验室