右美托咪定后处理对大鼠创伤性脑损伤后脑保护作用及其机制

作者：冀翔宇; 张丽娜; 刘然; 齐立杰; 王黎; 周赞宫^*

来源：中华实验外科杂志, 2020, 37(09).

• 右美托咪定
• 创伤性脑损伤
• 脱噬作用
• 自噬

目的观察右美托咪定对大鼠脑外伤后行为学、脑含水量及程序性神经元死亡的影响, 探讨右美托咪定减轻脑外伤的作用机制。方法健康雄性Wistar大鼠280只, 由青岛市实验动物中心提供, 按随机数字法分为4组:假手术组(Sham组)、脑外伤组(TBI组)、小剂量右美托咪定后处理组(DEX1组)和大剂量右美托咪定后处理组(DEX2组), 每组70只。按Feeney法建立自由落体脑损伤动物模型, 假手术组仅作开窗处理。右美托咪定在致伤后1 h经尾静脉5 min内以3 μg/kg的剂量静脉推注, 然后以3 μg/(kg·h)(DEX1组)或6 μg/(kg·h)(DEX2组)的剂量静脉输注2 h。每组随机抽取10只大鼠作水迷宫实验, 剩余60只大鼠按伤后不同时间点分为4个亚组:伤后1、3、5、7 d, 每个亚组15只。分别在伤后1、3、5、7 d行改良的神经功能缺损评分(mNSS)、干湿重法测定大脑半球含水量、苏木精-伊红(HE)染色观察损伤周边区及海马神经元形态变化、原位缺口末端标记法(TUNEL)法检测细胞凋亡、蛋白质印迹法(Western blot)检测微管相关蛋白1轻链3(LC3)和p62蛋白表达。水迷宫资料采用重复测量方差分析, 其余资料采用单因素方差分析或Kruskal-Wallis非参数检验(不满足方差分析条件时), 组间两两比较采用LSD检验(方差齐性时)或Dunnett’s T3检验(方差不齐时)。结果与TBI组比较, DEX1组、DEX2组伤后各时间点神经功能评分降低[伤后3 d:(8.00±1.07)、(6.87±1.95)分, F=126.203, P<0.01];水迷宫实验逃避潜伏期缩短[伤后8 d:(38.73±5.06)、(39.73±4.11) s, F=51.209, P<0.01]、目标象限内搜索时间延长[(51.75±14.37)、(53.27±11.45) s, F=14.104, P<0.01]及经过目标平台位置次数增加[(13.75±6.69)、(14.57±4.85)次, F=12.304, P<0.01];脑含水量减少[伤后3 d:(79.32±1.42)%、(79.33±2.86)%, F=18.142, P<0.01];损伤周围区及海马凋亡神经元减少[伤后3 d:(37.87±4.12)、(39.39±6.56)个, F=64.782, P<0.01];损伤周围区及海马LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和p62蛋白表达减少(伤后3 d:0.38±0.12比0.45±0.14、0.36±0.16比0.32±0.14, F=12.587、17.354, P<0.01)。DEX1、DEX2组之间上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论右美托咪定后处理可减轻大鼠脑外伤后学习及记忆功能障碍, 与减轻脑水肿、减少神经元凋亡和自噬有关;增大右美托咪定剂量上述脑保护作用并不增强。

• 单位
  青岛市市立医院; 青岛大学附属医院