miR-M11基因编辑对马立克病病毒体外复制的影响

作者：王伟东; 滕蔓; 郑鹿平; 刘金玲; 张文凯; 李林燕; 张志会; 樊剑鸣^*; 罗俊^*

来源：河南农业科学, 2023, 52(01): 134-143.

DOI：10.15933/j.cnki.1004-3268.2023.01.014

• 马立克病
• miR-M11
• 微小RNA
• CRISPR/Cas9
• 基因编辑
• qPCR
• 复制

为探究病毒编码的微小RNA前体基因miR-M11对马立克病病毒（MDV）体外复制能力的影响，以MDV国内分离株HN302为研究对象，利用CRISPR/Cas9系统靶向编辑并敲除位于Mid基因簇的miRM11，构建1株miR-M11基因编辑缺失毒株HN302ΔM11（克隆号C58-8-4）。经过PCR鉴定、测序分析、间接免疫荧光试验（IFA）、实时荧光定量PCR(qPCR)以及传代稳定性分析，证实HN302编码的miRM11被精确编辑并从病毒基因组中完全缺失，且未发生回复突变。病毒增殖曲线绘制结果显示，miRM11缺失毒株HN302ΔM11的增殖速度显著高于亲本毒株HN302(P<0.05)。综上，miR-M11是MDV复制的非必需基因，且其缺失后可增强MDV的体外复制能力。

• 单位
  公共卫生学院; 动物科技学院; 河南科技大学; 郑州大学; 河南省农业科学院