日本沼虾PI3Kc3基因克隆及表达分析

作者:朱永明; 武源清; 刘志伟; 黄旭雄*
来源:基因组学与应用生物学, 2021, Z3: 2916-2924.
DOI:10.13417/j.gab.040.002916

摘要

磷脂肌醇3-激酶(phospoinositide-3 kinases, PI3Ks)是真核生物中的一类关键调控因子,通过影响细胞存活、细胞迁移、细胞增殖等进而调控机体生长代谢,但迄今在日本沼虾中未见报道。本研究克隆了日本沼虾(Macrobrachium nipponense) PI3K基因mRNA全长序列,并对其表达进行了初步分析。结果表明:日本沼虾PI3K基因mRNA全长3 284 bp,其中5’UTR为138 bp,3’UTR为365 bp,开放阅读框(open reading frame,ORF)长2 778 bp,编码926个氨基酸。结构域分析表明其含有PI3K家族第Ⅳ类基因典型结构域PI3K C2、PI3Ka、PI3Kc;故将其命名为PI3Kc3。氨基酸序列同源性分析表明日本沼虾的PI3Kc3基因与凡纳滨对虾(Penaeus vannamei)的同源性最高,达71.27%。半定量PCR和荧光定量PCR结果显示,PI3Kc3基因在日本沼虾的眼睛、大脑、肝胰腺等组织以及受精卵至成虾各个发育时期均有表达,且表达量间无显著差异(P>0.05);同时,检测规格差异显著的全同胞雄虾个体第二步足、肌肉和肝胰腺组织表明大小规格间各组织表达无显著差异(P>0.05)。本研究初步分析了日本沼虾PI3Kc3基因结构及其表达分布,为进一步探讨日本沼虾生长调控提供分子基础。

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