体外培养大鼠耻骨联合软骨细胞的生物学特性

作者：葛成; 张志光; 项鹏

来源：中山大学学报(医学科学版), 2006, (04): 387-390.

DOI：10.3321/j.issn:1672-3554.2006.04.007

• 耻骨联合
• 软骨细胞
• 细胞培养
• 生物学特性

【目的】通过对大鼠耻骨联合软骨细胞的分离及体外培养,观察其生长、表型等一般生物学特点。【方法】采用胰蛋白酶、Ⅱ型胶原酶序贯消化法,从SD大鼠耻骨联合软骨组织中分离出软骨细胞,用含150mL/L胎牛血清的DMEM/F-12培养液原代和传代培养。分别以2g/L胶原酶消化2、6、12h,分析不同消化时间获取的细胞数量及生长情况。对6h消化组细胞进行Ⅱ型胶原免疫组化染色,并观察第1、4、7代的生长曲线。【结果】经胶原酶消化2、6、12h后,平均每100mg耻骨联合软骨获取的原代细胞数之间有统计学显著差异(P<0.01)。消化6h组可以获取数量丰富的原代细胞,生长状态好。大鼠耻骨联合细胞原代呈短梭形、三角形或多角形,有短细胞突起。Ⅱ型胶原免疫组化染色在第1、4代培养细胞均呈阳性,第7代培养细胞呈阴性。第7代细胞生长增殖比第1、4代慢。【结论】耻骨联合软骨细胞体外培养时属于有限细胞系。培养初期(第4代之前,含第4代)的细胞较好地保持了软骨细胞的表型,且增殖能力强,有可能作为软骨组织工程的种子细胞。

• 单位
  中山大学