科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
目的 获取泛耐药铜绿假单胞菌（PA）广谱噬菌体裂解酶，并观察其抗菌活性。方法 (1)取237株PA菌株，采用药敏实验筛选得到84株泛耐药PA菌株。采用噬菌斑测定法，将污水与10株泛耐药PA菌株混合培养，筛选得到9株泛耐药PA菌株噬菌体，并用84株泛耐药PA菌株，筛选出90%以上泛耐药PA菌株的广谱噬菌体。(2)采用Proteinase K裂解法及测序获取泛耐药PA菌株广谱噬菌体裂解酶基因、运用生物信息学工具（ORF finder和BLAST）进行序列确认，获得泛耐药PA菌株广谱噬菌体裂解酶的基因序列（目标序列），将目标序列克隆、转化、诱导纯化后得到泛耐药PA广谱噬菌体裂解酶。取泛耐药PA菌株，将其均匀涂抹至2个培养基，分别滴加5、10μL泛耐药PA菌株广谱噬菌体裂解酶，培养24 h时观察培养基噬菌斑生长情况。结果 得到泛耐药PA菌株广谱噬菌体EPA19及EPA19裂解酶lysEPA19。5、10μL的lysEPA19与泛耐药PA菌株混合培养后，培养基上均可见噬菌斑（5μL LysEPA19噬菌斑为11～13mm,10μL LysEPA19噬菌斑为23～27 mm）。结论 成功筛选得到泛耐药PA广谱噬菌体裂解酶lysEPA19，可有效抑制泛耐药PA菌株生长。
- 单位
