自拟安神方对心肾不交证失眠大鼠皮质和海马5-HT和DA信号通路的影响

作者：李雪; 徐雅; 杜**^*; 白俊杰; 王旭; 李靖

来源：辽宁中医药大学学报, 2023, 1-15.

• 自拟安神方
• 心肾不交证失眠
• 不同脑区
• DA
• 5-HT

目的：探索自拟安神方（简称安神方）对大鼠不同脑区5-HT和DA信号通路的影响，揭示安神方抗大鼠心肾不交证失眠的机制。方法：SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组、安神方高、中、低剂量组，每组10只。多因素方法制备改良的心肾不交证失眠大鼠模型，灌胃治疗2周。HE染色观察大鼠脑组织形态结构。高效液相色谱-电化学法（HPLC-ECD）检测大鼠皮质和海马多巴胺（dopamine，DA）和5-羟色胺（5-hydroxytryptamine，5-HT）的含量。免疫蛋白印迹法检测5-HT信号通路上5-HT1A受体(5-HT_(1A)R)、5-HT2A受体（5-HT_(2A)R）、磷酸腺苷反应元件结合蛋白（cAMP-responseelementbindingprotein，CREB）、蛋白激酶A（protein kinase A，PKA）和DA信号通路上多巴胺受体D1R1（D_(1)R_(1)）在皮质和海马的表达。结果：HE染色显示模型组大鼠皮质神经元有少量的凋亡，海马结构变化不明显，安神方能减轻皮质神经元的凋亡。HPLC-ECD结果显示，模型组皮质和海马DA含量均升高（P＜0.05），5-HT的含量均显著下降（P＜0.05），安神方显著降低皮质和海马DA的含量（P＜0.05），同时提高海马5-HT的含量（P＜0.05）。免疫印迹结果显示模型组皮质区大鼠5-HT_(1A)和CREB表达水平降低（P＜0.05），海马区D_(1)R_(1)水平明显升高（P＜0.05），安神方上调皮质5-HT受体5-HT_(1A)蛋白和信号通路上关键蛋白CREB的表达（P＜0.05），并且下调海马受体D_(1)R_(1)的蛋白表达（P＜0.05），其信号通路上CREB受体蛋白表达虽无统计学意义，但各给药组仍有上调趋势。结论：安神方抗心肾不交证失眠的机制可能与抑制皮质神经元凋亡，并促进皮质和海马5-HT通路功能，抑制DA通路功能有关。

• 单位
  西藏藏医药大学; 北京中医药大学