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摘要
利用基因重组技术,以油松PAL基因(TaPAL)CDS区(2 157bp)作为外源基因的同源重组片段,构建了pET-28a-TaPAL重组表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中融合表达并进行分析。经SDS-PAGE电泳检测,在分子量80KD处获得一条特异蛋白的表达条带,且其大小与预期相符。在温度28℃,IPTG浓度1.5mmol·L-1,时间3h条件下,重组质粒的表达量最大。可溶性分析表明,在最佳诱导条件下,该蛋白主要以包涵体形式存在。粗酶活性测定表明,粗酶(在20℃、IPTG浓度1mmol·L-1条件下诱导10h)比活力为55.3μmol·min-1·gpro-1,即55.3U·g-1。构...
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单位西北农林科技大学; 陕西省林业厅
