ABCB1介导HDAC非选择性抑制剂panobinostat耐药的机制研究

作者：窦永海; 高晓丽^*

来源：天津药学, 2022, 34(04): 12-19.

• panobinostat
• 肿瘤耐药
• ABC转运蛋白B1亚家族
• 药物蓄积

目的：探究ABCB1介导非选择性HDAC抑制剂panobinostat(PBST)在肿瘤细胞中耐药的机制。方法：以KB-3-1、SW620、HEK293/pcDNA3.1以及其对应的耐药细胞株KB-C2、SW620/Ad300、HEK293/ABCB1细胞为研究对象，利用MTT法评价panobinostat对上述细胞系中的增殖抑制活性，并利用基于MTT的逆转实验评价已报道的ABCB1逆转药物对PBST的耐药逆转效果。将PBST作用于耐药细胞，利用Western blot方法检测ABCB1蛋白表达情况。并通过免疫荧光法探究PBST对耐药细胞中ABCB1质膜定位的影响。以氚标记的紫杉醇为探针评价PBST在上述细胞中蓄积水平的差异。通过钒敏感的ATP酶活性实验探究PBST对ABCB1的ATP酶活性影响，并采用计算机辅助分子对接模拟PBST和ABCB1活性口袋的结合情况。结果：PBST的抗肿瘤活性在肿瘤多药耐药细胞中显著下调，已报道的ABCB1逆转药物，如verapamil、ibrutinib、nilotinib、lapatinib以及erlotinib，均可不同程度地逆转PBST耐药。在PBST处理后，肿瘤多药耐药细胞中ABCB1的蛋白表达水平上调，但ABCB1的质膜定位未发生显著改变。PBST作用于KB-C2细胞可显著增加氚标紫杉醇的蓄积水平，但不改变亲本细胞KB-3-1中的蓄积。此外，PBST上调ABCB1的ATP酶活性，并可与ABCB1活性口袋稳定结合。结论：PBST可通过上调ABCB1在肿瘤细胞中的表达水平，下调其药物蓄积，介导其耐药，联合ABCB1抑制剂是潜在的逆转耐药策略。

• 单位
  天津市永久医院; 天津市第五中心医院