高感染力嵌合型腺病毒载体的构建及其感染力的流式细胞术测定

作者：马炬明; 苏长青; 王伟国; 施建国; 胡慧珍; 李林芳

来源：实用癌症杂志, 2007, (06): 565-568.

• 肿瘤
• 基因治疗
• 腺病毒载体
• 35型腺病毒
• 5型腺病 Cancer
• Gene therapy
• Adenovirus vector
• Adenovirus type 35
• Adenovirus type

目的构建1种35型腺病毒(Ad35)Fiber替代5型腺病毒(Ad5)Fiber的嵌合型腺病毒载体,探索该腺病毒载体感染肿瘤细胞的效率。方法PCR扩增Ad35腺病毒Fiber序列,插入并置换Ad5的Fiber序列,构建Ad5-F35嵌合型腺病毒载体,使之携带绿色荧光蛋白报告基因EGFP;以MOI=5的Ad5-F35EGFP病毒感染度感染淋巴瘤细胞raji和胃癌细胞SGC-7901,流式细胞术检测EGFP表达,借以判断病毒感染细胞的能力。结果成功构建携带EGFP的嵌合型腺病毒载体pAd5-F35EGFP,并在293细胞中重组出Ad5-F35EGFP嵌合型腺病毒,扩增纯化后病毒滴度达到3.4×10...

• 单位
  中国人民解放军第二军医大学; 中国人民解放军一一七医院