miR-557通过Notch2/hes1信号通路对肺癌细胞的影响

作者：李国平; 周凌燕; 刘志聪; 於建平; 陈凯; 张国妹

来源：浙江实用医学, 2022, 27(4): 271-277.

DOI：10.3969/j.issn.1007-3299.2022.04.001

• miR-557
• Notch2/发状分裂相关增强子1通路
• 肺癌细胞

目的 探讨miR-557通过Notch2/发状分裂相关增强子1(hes1)信号通路对肺癌细胞增殖、侵袭、迁移的影响.方法 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测人正常肺上皮细胞BEAS-2B及肺癌细胞SPC-A-1、A549、NCI-H446、PC-9中miR-557表达水平.将A549细胞分为对照组(A549细胞在RPMI-1640培养基中正常培养)、miR-NC组[A549细胞转染miR-557模拟物(mimic)阴性对照]、miR-557组(A549细胞转染miR-557mimic)、Notch通路激动剂组(5mg/L Jagged1蛋白处理A549细胞)、miR-557+Notch通路激动剂组(转染miR-557mimic成功后加入5mg/L Jagged1蛋白处理A549细胞);qRT-PCR检测A549细胞中miR-557表达水平;细胞计数试剂盒-8检测A549细胞增殖;Transwell检测A549细胞侵袭;划痕实验检测A549细胞迁移;蛋白免疫印迹法检测A549细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、Notch2、hes1蛋白表达水平.结果 与人正常肺上皮细胞BEAS-2B比较,肺癌细胞SPC-A-1、A549、NCI-H446、PC-9中miR-557表达水平显著降低(P＜0.05),且A549细胞中miR-557表达水平最低,因此,选择A549细胞为研究对象;与对照组、miR-NC组比较,miR-557组A549细胞中miR-557表达水平升高,细胞存活率、侵袭细胞数、划痕愈合率、PCNA、MMP-2、MMP-9、Notch2、hes1蛋白表达水平降低(P＜0.05);与对照组比较,Notch通路激动剂组A549细胞中miR-557表达水平差异无统计学意义(P＞0.05),细胞存活率、侵袭细胞数、划痕愈合率、PCNA、MMP-2、MMP-9、Notch2、hes1 蛋白表达水平升高(P＜0.05);与 miR-557 组比较,miR-557+Notch通路激动剂组A549细胞中miR-557表达水平差异无统计学意义(P＞0.05),细胞存活率、侵袭细胞数、划痕愈合率、PCNA、MMP-2、MMP-9、Notch2、hes1蛋白表达水平升高(P＜0.05).结论 过表达miR-557通过抑制Notch2/hes1通路抑制A549细胞增殖、侵袭、迁移.

• 单位
  湖州市中心医院