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摘要
为了对10份广西野生铁皮石斛种质资源进行遗传多样性分析，本研究以高多糖野生铁皮石斛嫩叶为材料，通过响应面优化法对影响DNA提取质量的植物组织量、CTAB浓度和水浴时间进行优化，在获得最佳提取方法的基础上，通过正交实验对铁皮石斛的SCoT-PCR反应体系中DNA模板量、引物浓度和2×Es Taq PCR Master Mix用量3个影响因素进行优化，建立最佳的SCoT-PCR反应体系；利用Popgene32.0及NTSYS-pc软件对10份铁皮石斛种质进行遗传多样性分析。结果表明，提取铁皮石斛总DNA的最佳方法为：植物组织量125 mg、CTAB浓度3%、水浴时间20 min，在此条件下，DNA提取浓度为263.2±17.5 ng/μL；最优SCoT-PCR反应体系（20 μL）为：1 μL DNA模板（40 ng/μL）、1.2 μL引物（10 μmol/L）、9 μL Mix混合液，8.8 μL ddH2O；广西野生铁皮石斛种质间遗传差异较大，观测等位基因数（Na）在1.666 7～2.000 0之间，平均值为1.882 7；有效等位基因数（Ne）在1.314 1～1.727 7之间，平均值为1.589 8；基因多样性指数（H）在0.206 7～0.414 0之间，平均值为0.337 6，香农信息指数（I）在0.322 8～0.602 6之间，平均值为0.497 8，10份铁皮石斛种质遗传相似系数为0.54～0.77。本研究通过SCoT分子标记揭示了10份广西野生铁皮石斛种质的遗传多样性，为种质鉴定、育种实践及分子遗传研究提供理论依据。
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