骨肉瘤原代癌相关成纤维细胞对骨肉瘤SOSP-9607细胞增殖的影响

作者：张瑞; 唐启胜; 丁瑞; 杨龙飞^*

来源：肿瘤研究与临床, 2020, 32(12).

• 骨肉瘤
• 癌相关成纤维细胞
• 细胞增殖
• 细胞周期蛋白D

目的探讨骨肉瘤微环境中的癌相关成纤维细胞(CAF)对骨肉瘤SOSP-9607细胞增殖的影响及可能机制。方法通过原代培养获得骨肉瘤来源的CAF及癌旁组织正常成纤维细胞(NF), 使用流式细胞术检测CAF和NF的α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和成纤维细胞活化蛋白(FAP)的表达。收集CAF、NF的培养液, 制备为相应条件培养液。将SOSP-9607细胞分为对照组、NF处理组、CAF处理组, 分别应用新制备的未经处理的培养液及CAF、NF条件培养液处理。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测SOSP-9607细胞各处理组细胞增殖能力, 实时荧光定量聚合酶链反应、蛋白质印迹法检测各SOSP-9607细胞组cyclin D1表达水平。结果 CAF中α-SMA和FAP阳性率分别为(86±5)%和(74±8)%, NF中分别为(15±3)%和(10±1)%, CAF与NF间差异均有统计学意义(t=20.83, P<0.05;t=14.30, P<0.01)。MTT法检测显示, CAF处理组SOSP-9607细胞培养24 h后能够促进细胞增殖;96 h后490 nm处吸光度值达到1.83±0.26, NF处理组为1.40±0.17, 对照组为1.35±0.15, 差异有统计学意义(F=8.59, P<0.05)。CAF处理组SOSP-9607细胞培养48 h后, cyclin D1 mRNA相对表达量上升至1.57±0.13, NF处理组为1.05±0.15, 对照组为1, 三组间差异有统计学意义(F=23.09, P<0.05), 同时cyclin D1蛋白的表达水平也明显增强。结论 CAF能够促进骨肉瘤SOSP-9607细胞增殖, 并促进cyclin D1基因的表达。

• 单位
  唐都医院; 中心实验室; 第四军医大学