wCTLA-4胞外段与HBc融合DNA疫苗的构建和真核表达

作者：尹莹; 黄汉菊; 陆蒙吉; 孟忠吉

来源：华中医学杂志, 2006, (04): 299-300+303.

• DNA疫苗
• 细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白-4
• 人乙型肝炎病毒核衣壳蛋白
• 真核表达

目的构建土拨鼠细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白-4(wCTLA-4)细胞外部分和人乙型肝炎病毒核衣壳(HBc)融合蛋白表达质粒pwCTLA-4-HBc并在真核细胞中表达。方法通过限制性酶切和T4连接,以HBc基因片段置换pwCTLA-4-WHc质粒中的WHc片段,得到质粒pwCTLA-4-HBc,分别转染幼仓鼠肾细胞系(BHK)和人宫颈癌细胞系(Hela),间接免疫荧光和化学发光免疫法检测融合蛋白的表达。结果融合蛋白编码质粒转染BHK细胞后可检测到HBc抗原免疫荧光,转染Hela细胞后细胞裂解液和培养上清中均可检测到融合蛋白。结论成功构建wCTLA-4胞外段和HBc融合蛋白表达质粒pwCTLA-4-HBc,融合蛋白可以在真核细胞表达并分泌到细胞外。

• 单位
  杜伊斯堡-埃森大学; 华中科技大学同济医学院