通过耐酸性改造在昆虫细胞中组装FMDV空衣壳结构

作者：曹轶梅; 卢曾军; 孙甲川; 孙普; 郭建宏; 刘在新

来源：中国农业科学, 2009, (03): 1069-1077.

• FMDV
• 耐酸性改造
• 昆虫细胞
• 组装
• 空衣壳结构 FMDV
• acid-resistant modification
• insect cells
• assembly
• empty capsid structures

【目的】口蹄疫病毒(FMDV)对酸很敏感,当pH值低于7时,二十面体对称的衣壳结构就会裂解成12S的五聚体。而昆虫细胞培养基的正常pH值在6.3左右,很难应用杆状病毒表达系统在昆虫细胞中组装天然的FMDV空衣壳结构。本研究旨在通过耐酸性改造,应用杆状病毒表达载体在昆虫细胞中组装产生AsiaⅠ型FMDV空衣壳结构。【方法】应用定点突变技术改变VP3上的H140和H143为亮氨酸,以提高空衣壳对酸的耐受性。将改造和未改造的P12A基因和3C基因插入带双启动子的杆状病毒转移载体pFastBacTM Dual中,通过在大肠杆菌内转座重组,获得重组杆粒,转染Sf9细胞,获得两株表达FMDV全衣壳蛋白的重...

• 单位
  中国农业科学院兰州兽医研究所; 农业部; 家畜疫病病原生物学国家重点实验室