摘要
目的 制备松茸(Tricholoma matsutake)蛋白抗氧化肽,并探究其构效关系。方法 利用响应面试验优化松茸蛋白提取工艺,并进行氨基酸分析,质谱鉴定超滤后的松茸蛋白模拟胃肠消化产物,固相合成两条肽评分最高的肽段,通过化学方法和H2O2诱导建立氧化损伤HepaRG细胞模型,评价松茸多肽抗氧化活性,同时结合红外光谱和圆二光谱分析其构效关系。结果 松茸蛋白提取较佳工艺参数为提取温度48℃、提取时间120 min、pH 10,此条件下的松茸蛋白提取率高达(72.56±0.45)%;松茸蛋白氨基酸种类齐全,必需氨基酸占总量氨基酸的27.65%; SHSFFLP的1,1-二苯基苦基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl, DPPH)自由基和2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐[2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)ammonium salt,ABTS]阳离子自由基清除率显著高于SFPPIWQ(P<0.05),SHSFFLP和SFPPIWQ能显著降低受氧化损伤HepaRG细胞中活性氧和丙二醛含量,提升细胞内超氧化物歧化酶活力。结论 本研究采用优化的松茸蛋白提取工艺筛选出两条抗氧化肽HSFFLP和SFPPIWQ, SHSFFLP抗氧化能力强于SFPPIWQ可能与二级结构β折叠的相对含量较高有关。
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