甘薯薯瘟病菌特异性PCR快速检测方法

作者:张鸿; 刘中华; 林志坚; 许泳清; 李华伟; 王嘉滢; 林赵淼; 李国良; 邱永祥; 纪荣昌; 罗文彬; 汤浩; 邱思鑫*
来源:江苏师范大学学报(自然科学版), 2019, 37(04): 37-41.

摘要

针对目前甘薯薯瘟病鉴定耗时长,且缺乏特异性标记的问题,首先根据薯瘟病菌Ralstonia solanacearum特异性基因orf428设计了一对特异性分子检测引物,对13株薯瘟病菌、3株甘薯其他病原细菌和12株其他7种寄主青枯菌进行PCR检测,结果显示,只有薯瘟病菌能特异扩增1 641 bp的目标序列,且对菌体DNA最低检出率达到1 pg/μL.其次,通过水煮法快速提取DNA,简化了DNA提取方法;在PCR体系中加入体积分数为1%的二甲基亚砜(DMSO)后,扩增条带更为明亮,优化了PCR检测体系.此技术易于操作、灵敏度高、特异性强,可用于对病残体、发病植株和种苗中的薯瘟病菌检测,以对甘薯薯瘟病进行预测、监测及防治具有重要意义.

  • 单位
    福建省农业科学院; 福建农林大学金山学院; 农业部