果蝇心脏发育标记基因Svp的多克隆抗体制备

作者：李玉玲; 赵梦婧; 李瑞可; 张亚楠; 吴秀山; 袁婺洲^*

来源：激光生物学报, 2020, 29(05): 433-445.

• Svp
• 果蝇
• 心脏发育
• DNA疫苗
• 多克隆抗体

研究果蝇的心脏发育基因表达调控机制,其相应靶点的抗体必不可少。但目前市场上缺乏此类商用抗体,因此本研究选择果蝇心脏发育中的标记基因Svp(Seven-up),并采用DNA免疫技术来快速制备其抗体。首先通过聚合酶链式反应(PCR)扩增出Svp基因编码区部分序列,然后将其连接到真核表达载体pCAGGS-P7上,再将重组质粒pCAGGS-P7-Svp直接注射进小鼠体内,使外源基因在活体内表达,产生的抗原激活了小鼠的特异性细胞免疫和体液免疫,从而分泌相应的抗体,取小鼠的血清收集获得抗体。最后用蛋白质印迹(Western blot)和胚胎免疫荧光技术检测Svp抗体的效价和特异性。结果表明,制备的Svp多克隆抗体具有高效价和特异性,为后续的果蝇心脏发育研究奠定了基础。

• 单位
  生命科学学院; 湖南师范大学