miR-125b-5p对过氧化氢诱导的视网膜神经节细胞损伤的影响及其机制研究

作者：谭蓓蓓; 郭婧澜; 李友谊; 刘俊; 陈伯勋^*

来源：中国临床药理学杂志, 2020, 36(04): 414-418.

DOI：10.13699/j.cnki.1001-6821.2020.04.009

• 视网膜神经节细胞
• 过氧化氢
• 微小RNA-125b-5p
• 人脂质运载蛋白2
• 损伤
• 凋亡

目的研究miR-125b-5p对H2O2诱导的小鼠视网膜神经节细胞(RGCs)损伤的影响及潜在的机制。方法将RGC-5分为12组:对照组(细胞未处理组)、H2O2组(200μmol·L-1H2O2处理12 h建立氧化损伤模型)、miRNC组、miR-125-5p组、anti-miR-NC组、anti-miR-125-5p组、H2O2+miR-NC组、H2O2+miR-125b-5p组、H2O2+si-NC组、H2O2+si-LCN2组、H2O2+miR-125b-5p+pcD NA组和H2O2+miR-125b-5p+pcD NA-LCN2组。H2O2+转染组:细胞转染miR-125b-5p或si-LCN2 48 h后,用200μmol·L-1H2O2处理12 h。以免疫印迹法检测细胞中miR-125b-5p和LCN2蛋白表达水平,以流式细胞术和免疫印迹法分别检测凋亡率及其凋亡相关的B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达水平,可见分光光度法检测丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的水平。结果 (1)对照组和H2O2组的miR-125b-5p蛋白表达水平分别为1. 01±0. 09,0. 39±0. 04;这2组的LCN2蛋白表达水平分别为0. 43±0. 04,0. 87±0. 08;这2组的MDA含量分别为(5. 06±0. 49),(15. 24±1. 37) nmol·mg-1;这2组的SOD水平分别为(3. 79±0. 35),(0. 56±0. 05) U·mg-1;这2组的细胞凋亡率分别为(7. 25±0. 73)%,(27. 69±2. 86)%;这2组的Bax蛋白表达水平分别为0. 22±0. 03,0. 63±0. 06;这2组的Bcl-2蛋白表达水平分别为0. 77±0. 07,0. 34±0. 03,组间比较,上述指标的差异均有统计学意义(均P <0. 05)。(2)转染miR-125b-5p后,H2O2+miR-NC组和H2O2+miR-125b-5p组的miR-125b-5p蛋白表达水平分别为0. 39±0. 04,0. 89±0. 08;这2组的Bcl-2蛋白表达水平分别为0. 34±0. 03,0. 64±0. 06;这2组的Bax蛋白表达水平分别为0. 64±0. 06,0. 35±0. 03;这2组的细胞凋亡率分别为(29. 67±2. 86)%,(12. 65±1. 46)%;这2组的MDA含量分别为(15. 47±1. 36),(8. 36±0. 79)nmol·mg-1;这2组的SOD水平分别为(0. 48±0. 04),(3. 15±0. 31) U·mg-1,组间比较,上述指标的差异均有统计学意义(均P <0. 05)。(3)过表达miR-125b-5p和LCN2后,H2O2+miR-125b-5p+pcD NA组和H2O2+miR-125b-5p+pcD NA-LCN2组的LCN2蛋白表达水平分别为0. 37±0. 04,0. 74±0. 07;这2组的Bcl-2蛋白表达水平分别为0. 67±0. 05,0. 44±0. 04;这2组的Bax蛋白表达水平分别为0. 27±0. 03,0. 49±0. 04;这2组的细胞凋亡率分别为(11. 69±1. 27)%,(22. 45±2. 08)%;这2组的MDA含量分别为(8. 83±0. 85),(12. 24±1. 27) nmol·mg-1;这2组的SOD水平分别为(3. 29±0. 31),(1. 02±0. 09)U·mg-1,组间比较,上述指标的差异均有统计学意义(均P <0. 05)。结论 miR-125b-5p通过靶向调控LCN2水平,减轻H2O2对RGCs的损伤并抑制细胞凋亡。

• 单位
  西南医科大学