摘要
目的评价ErbB2相互作用蛋白(Erbin)在胞壁酰二肽(MDP)诱导小鼠巨噬细胞炎性反应中的作用。方法利用CRISPR/CAS9编辑技术构建Erbin基因敲除型RAW264.7巨噬细胞系(Erbin-/- RAW264.7), 体外培养野生型RAW264.7巨噬细胞, 采用随机数字表法将两类细胞分为2组(n=16), 分别为RAW264.7组和RAW264.7+MDP组、Erbin-/-RAW264.7组和Erbin-/-RAW264.7+MDP组。各MDP组采用10 μg/ml MDP孵育6 h, 随后采用免疫荧光法测定NF-κB p65表达, 采用ELISA法测定培养液TNF-α和IL-6浓度。结果与RAW264.7组比较, RAW264.7+MDP组培养液TNF-α和IL-6浓度升高(P<0.05), NF-κB p65向核内移动, 红色荧光面积增加;与RAW264.7+MDP组和Erbin-/- RAW264.7组比较, Erbin-/-RAW264.7+ MDP组培养液TNF-α和IL-6浓度升高(P<0.05), NF-κB p65向核内移动更加明显, 红色荧光面积增加。结论 Erbin可通过抑制NF-κB p65活性, 在MDP诱导小鼠巨噬细胞炎性反应中发挥抗炎作用。
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单位武汉大学中南医院