白藜芦醇预处理促进miR-20b-5p抑制STIM2改善线粒体的功能减轻心肌缺血再灌注损伤

作者：李静; 段群军; 沈健

来源：中国中药杂志, 2022, 1-12.

DOI：10.19540/j.cnki.cjcmm.20220308.401

• 白藜芦醇
• 微小RNA-20b-5p
• 基质相互作用分子2
• 缺血再灌注
• 线粒体

探究白藜芦醇（RES）预处理通过微小RNA-20b-5p（miR-20b-5p）抑制基质相互作用分子2（STIM2）改善线粒体的功能减轻心肌缺血再灌注（IR）损伤的作用机制。将90只大鼠随机分成假手术（sham）组、模型（IR）组、IR+RES组（50 mg·kg~(-1) RES）、IR+RES+antagomir NC组（50 mg·kg~(-1) RES+80 mg·kg~(-1) antagomir NC）、IR+RES+miR-20b-5p antagomir组（50 mg·kg~(-1) RES+80 mg·kg~(-1) miR-20b-5p antagomir），每组18只。使用冠状动脉左前降支结扎法建立IR大鼠模型，术前2周IR+RES组大鼠腹腔注射50 mg·kg~(-1) RES，sham组、IR组注射等剂量生理盐水，每日1次。超声仪检测各组大鼠左室舒张末期内径（LVIDd）、左心室收缩末期内径（LVIDs）；2，3，5-三苯基氯化四氮唑（TTC）法及苏木精-伊红（HE）染色法分别检测心肌梗死面积及组织病理学情况；实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法检测心肌组织miR-20b-5p表达。通过氧糖剥夺/复氧（OGD/R）构建H9c2心肌细胞OGD/R模型；CCK-8法检测H9c2细胞活力；H9c2细胞分为空白（control）组、OGD/R组、OGD/R+RES组（25 μmol·L~(-1)）、OGD/R+RES+inhibitor NC组、OGD/R+RES+miR-20b-5p inhibitor组、mimic NC组、miR-20b-5p mimic组、inhibitor NC组、miR-20b-5p inhibitor组；流式细胞仪检测细胞凋亡；Western blot法检测细胞Bcl-2相关X蛋白（Bax）、cleaved-半胱氨酸蛋白酶3(cleaved-caspase 3)、B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、STIM2表达；根据线粒体膜电位检测试剂盒、活性氧（ROS）检测试剂盒、三磷酸腺苷（ATP）测定试剂盒分别检测线粒体膜电位（MMP）、ROS、ATP水平；双荧光素酶报告基因实验验证miR-20b与STIM2靶向关系。与sham组相比，IR组心肌梗死面积、LVIDd、LVIDs、心肌组织病理程度显著增加，miR-20b-5p表达显著降低（P＜0.05）；与IR组相比，IR+R...

• 单位
  浙江大学医学院附属第二医院