猪流行性腹泻病毒S蛋白多表位抗原免疫原性分析

作者：李丽; 唐奇; 马跃宇; 张溪妍; 费东亮; 王书全^*

来源：中国兽医学报, 2022, 42(01): 20-46.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2022.01.04

• 流行性腹泻病毒
• S蛋白
• 抗原表位
• 超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素A
• 免疫原性

在猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)经典毒株CV777毒株S基因基础上，选取S抗原优势表位EP(499～638 aa、748～755 aa、764～771 aa和1 368～1 374 aa)和超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)基因，优化后通过编码柔性连接肽(GGGGS)密码子进行连接，分别构建重组质粒pET-28a-S、pET-28a-S-SEA和pET-28a-S-EP-SEA。表达纯化的重组蛋白经SDS-PAGE和Western blot鉴定后免疫小鼠，以评价重组蛋白的免疫原性。结果显示，重组质粒经IPTG诱导后获得表达，SDS-PAGE分析显示其相对分子质量分别为21,48,54 kDa,与理论值相符。Western blot结果显示，重组蛋白与PEDV阳性血清具有良好的反应原性。纯化后的重组蛋白免疫小鼠，产生了较强的体液免疫和细胞免疫，其中免疫重组蛋白S-EP-SEA产生特异性IgG高于免疫重组蛋白S和S-SEA,细胞因子IFN-γ、IL-2和IL-4水平也高于其他2组。结果表明，本试验制备的重组蛋白S-EP-SE具有良好的免疫原性，为猪流行性腹泻多表位疫苗研制提供了理论依据。

• 单位
  锦州医科大学