摘要
目的观察p55PIK蛋白在雌激素受体(ER)阳性人乳腺癌细胞株MCF-7及ER阴性人乳腺癌细胞株MDAMB-231内的表达情况,并进一步探讨干扰p55PIK蛋白的表达对2种细胞增殖及迁移能力的影响,及可能的机制。方法Western blot检测p55PIK在MCF-7及MDA-MB-231细胞株内的表达情况;瞬时转染特异性针对p55PIK蛋白的siRNA,并以无关序列siRNA(siRNA-NC)和未转染细胞作为对照(blank),Western blot检测p55PIK蛋白表达的下调效果以及下调p55PIK后细胞内Akt及G蛋白偶联雌激素受体(G-protien coupled estrogen receptor,GPER)的表达变化;流式细胞术检测p55PIK表达下调对细胞周期的影响;MTT法和Transwell实验检测下调p55PIK后乳腺癌细胞增殖和迁移能力的改变。结果 p55PIK蛋白在人乳腺癌细胞株MCF-7及MDA-MB-231内均有表达,在MDA-MB-231细胞内表达强于MCF-7细胞;siRNA-p55PIK明显下调MCF-7及MDA-MB-231细胞中p55PIK蛋白的表达;Transwell实验显示下调p55PIK后MCF-7及MDA-MB-231细胞迁移能力均下降,且MCF-7细胞的siRNA-p55PIK组迁移能力显著低于siRNA-NC组[(44.2±7.6)vs.(83.7±14.8)]以及空白对照组[(44.2±7.6)vs.(95.9±17.3)](均P<0.01),MDA-MB-231细胞亦是siRNA-p55PIK组显著低于siRNA-NC组[(94.6±9.7)vs.(179.5±19.1)]和空白对照组[(94.6±9.7)vs.(194.7±34.9)](均P<0.01);MTT检测显示下调p55PIK后,MCF-7及MDA-MB-231细胞生长均明显受到抑制;Western blot结果显示下调p55PIK蛋白后,Akt蛋白磷酸化水平变化不明显;ER(-)细胞MDA-MB-231内GPER蛋白表达增加,而ER(+)细胞MCF-7内GPER表达变化不明显。结论 p55PIK蛋白在人乳腺癌细胞株MCF-7及MDA-MB-231内的表达有差异,下调p55PIK的表达可显著抑制MCF-7及MDA-MB-231细胞体外增殖和迁移能力,并可上调ER(-)细胞MDA-MB-231内GPER蛋白的表达,为ER(-/+)乳腺癌的预后观察及临床治疗提供了新思路。
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单位河南大学; 河南省人民医院