摘要
本研究以水稻日本晴(Oryza sativa L. spp. japonica)种子为材料,通过酶标法、实时荧光定量PCR技术及激光共聚焦扫描显微技术,对组织蛋白酶B (cathepsin B, CathB)活性、CathB1表达水平、caspase活性及水稻糊粉层细胞存活率等进行测定与分析,初步探讨CathB在调节萌发水稻种子糊粉层细胞程序性死亡(programmed cell death, PCD)中的作用。结果表明:在水稻种子萌发初期,糊粉层细胞中CathB的活性水平及其基因转录水平呈现时间依赖性,而且CathB专一性抑制剂CA074和caspase-3专一性抑制剂Ac-DEVD-CHO均可显著抑制CathB的活性和caspase-3的活性,但对caspase-1的活性无影响。此外,这两种抑制剂均可显著降低糊粉层细胞死亡的数目。以上结果证实,CathB在萌发水稻种子中发挥类似caspase-3的活性,且与具有类似caspase-3活性的蛋白酶一起调节糊粉层PCD的发生。该结果为进一步研究水稻种子萌发过程糊粉层PCD发生的分子机制提供了理论依据。
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单位海南大学; 生命科学学院