表达降钙素基因相关肽的单纯疱疹病毒Ⅰ型扩增子载体的构建、包装和扩增

作者：吴军; 张海鸥; 陈玉丙; 周芬莉; 胡俊; 李珂静

来源：中国实验诊断学, 2006, 10(09): 1033-1035.

DOI：10.3969/j.issn.1007-4287.2006.09.038

• HSV-I降钙素基因相关肽
• 基因表达与调控
• 载体

目的对单纯疱疹病毒Ⅰ型扩增子质料装载降钙素基因相关肽,并进行包装和扩增。方法分别钓取pac基因和γ134.5基因,克隆入pMD18-T载体中。pSV载体经HindⅢ和BamHⅠ双酶切,获得lacZ片段,自身环化形成pUPO-γ134.5-lacZ。合成CGRP基因序列,将此基因替换pUPO-γ134.5-lacZ质粒中的lacZ基因,插入γ134.5基因位点中,即pUPO-Δγ134.5-CGRP。再用单纯疱疹病毒温敏株辅助在BHK细胞中包装、扩增,通过检测lacZ的表达反映扩增子病毒滴度。结果酶切鉴定证实重组子构建成功。重组扩增子质粒的包装、扩增由BHK细胞的形态变化和X-gal原位检测载体lacZ的表达证实。扩增子假型病毒滴度达3.5×105TU/ml。结论本研究构建、包装、扩增的携带降钙素基因相关肽的假型病毒有较高感染性,这种扩增子病毒可作为实验研究的有力工具。

• 单位
  神经内科; 吉林大学; 北京大学深圳医院