MicroRNA-196a靶向调节HDAC9对MC3T3-E1细胞成骨分化的影响

作者：李华峰^*; 张广凤; 张旭; 鞠文文; 王婧婷; 吴桐

来源：中国骨质疏松杂志, 2022, 28(09): 1303-1309.

DOI：10.3969/j.issn.1006-7108.2022.09.010

• 微小RNA-196a
• 组蛋白去乙酰化酶9
• MC3T3-E1细胞
• 成骨分化
• 碱性磷酸酶

目的 探究微小RNA(miR)-196a靶向调节组蛋白去乙酰化酶9(HDAC9)对MC3T3-E1细胞成骨分化的影响。方法将MC3T3-E1细胞分为对照组(Cont)组、诱导组、miR-196a-mimics-NC组、miR-196a-mimics组、miR-196a-inhibitor-NC组、miR-196a-inhibitor组、miR-196a-mimics+pCMV-HDAC9-NC组、miR-196a-mimics+pCMV-HDAC9组，根据分组转染后进行成骨诱导。定量荧光PCR检测MC3T3-E1细胞中miR-196a、HDAC9表达量；试剂盒检测碱性磷酸酶(ALP)活性；茜素红染色观察矿化程度；Western blot检测HDAC9、ALP、Runt相关转录因子2(Runx2)、胶原蛋白I(COL1)、骨桥蛋白(OPN)、Histone H3、Histone H3(acetyl K9、K14和K23)表达量。结果 与Cont组相比，诱导组MC3T3-E1细胞中miR-196a表达、ALP、Runx2、COL1、OPN蛋白表达、ALP活性、矿化程度及Histone H3 K9、K14、K23位点乙酰化水平增高(P<0.05),HDAC9 mRNA和蛋白表达降低(P<0.05)。转染miR-196a-mimics可明显增加miR-196a表达，降低HDAC9表达，并增加ALP、Runx2、COL1、OPN蛋白表达、ALP活性、矿化程度及Histone H3乙酰化，转染miR-196a-inhibitor则作用相反。miR-196a可靶向下调HDAC9表达，过表达HDAC9可部分逆转miR-196a mimics对MC3T3-E1细胞成骨分化的促进效应。结论 miR-196a可靶向下调HDAC9表达，增加组蛋白乙酰化水平，促进MC3T3-E1细胞成骨分化。

• 单位
  深圳市第三人民医院; 中山市人民医院; 齐齐哈尔医学院附属第三医院; 深圳大学