肺岩宁下调转录因子Snail表达抑制人肺腺癌A549细胞EMT发生及侵袭转移

作者：张亚辉; 蔡玥娇; 邓海滨^*; 王中奇; 徐振晔

来源：世界科学技术-中医药现代化, 2023, 25(04): 1239-1249.

• 肺岩宁方
• 肺癌
• EMT
• 侵袭转移
• Snail

目的 研究肺岩宁抑制人肺腺癌A549细胞侵袭转移的分子机制。方法 体外培养A549细胞，细胞计数试剂盒（Cell counting kit 8,CCK-8）检测不同浓度的肺岩宁对A549细胞生长增殖的影响；细胞形态学观察和免疫印迹实验（Western blot）检测转化生长因子β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1)对A549细胞上皮间质转化（Epithelial mesenchymal transformation,EMT）发生的影响；Western blot、实时荧光定量聚合酶链式反应（Real time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR）实验检测TGF-β1诱导前后，肺岩宁对A549细胞EMT标志蛋白及mRNA表达变化；划痕实验、Transwell实验检测TGF-β1诱导前后，肺岩宁对A549细胞侵袭和迁移能力的影响变化；构建稳定过表达Snail的A549细胞株，Western blot、RT-qPCR实验检测稳定过表达锌指转录因子（Snail）后，肺岩宁对A549细胞EMT标志蛋白及mRNA表达变化；划痕实验、Transwell实验检测稳定过表达Snail后，肺岩宁对A549细胞侵袭和迁移能力的影响变化。结果 不同浓度的肺岩宁处理后，A549细胞的生长受到不同程度的抑制（P<0.01）;10 ng·mL-1的TGF-β1可以诱导A549细胞EMT发生；与对照组比较，TGF-β1诱导后，A549细胞侵袭迁移能力增加（P<0.01），而与TGF-β1组比较，肺岩宁能够抑制A549细胞的侵袭迁移能力（P<0.01）、上调A549细胞中E钙黏蛋白（E-cadherin）及Ecadherin mRNA的表达（P<0.01），下调N钙黏蛋白（N-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）和Snail及其mRNA的表达（P<0.05），抑制A549细胞EMT发生；与TGF-β1诱导组比较，稳定过表达Snail能够减弱肺岩宁对A549细胞的侵袭转移能力的抑制作用（P<0.01）、减弱肺岩宁对A549细胞中E-cadherin及其mRNA表达的上调作用（P<0.01）、N-cadherin、Snail(P<0.01)Vimentin(P>0.05)和及其mRNA表达的下调作用。结论 肺岩宁方可能通过下调转录因子Snail的表达抑制A549细胞EMT发生及其侵袭转移。

• 单位
  上海中医药大学附属龙华医院