摘要
目的:探索芍药苷对缺氧人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)的保护作用及其摄取机制。方法:采集、培养HUVEC,使用三气培养箱建立缺氧内皮细胞模型。采用噻唑蓝(MTT)法筛选芍药苷适宜浓度,酶联免疫吸附法(ELISA)检测内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、内皮素-1(ET-1)、凝血酶调节蛋白(TM)、组织因子(TF)、组织型纤溶酶原激活剂(tPA)和纤溶酶原激活抑制剂-1(PAI-1)因子水平;HPLC-MS法测定细胞内芍药苷的浓度,观察细胞状态、药物浓度、用药时间对其摄取的影响。结果:芍药苷浓度为25μg/mL~200μg/mL时无显著细胞毒性;与正常对照组相比,模型对照组细胞eNOS和tPA含量降低,ET-1、TF与PAI-1含量明显增高(P<0.05);与模型对照组相比,芍药苷各组eNOS、TM和tPA含量呈上升趋势,ET-1、TF、PAI-1水平下降,并随芍药苷剂量升高而明显降低(P<0.05);摄取实验中,缺氧HUVEC对芍药苷最大摄取量(Imax)与给药剂量呈正相关(R=0.991),缺氧HUVEC以芍药苷干预后细胞Imax显著高于正常给药组(P<0.05);正常给药组与芍药苷100、200μg/mL组摄取达峰时间(Tmax)均为120 min,芍药苷200μg/mL组Tmax增至240 min(P<0.05);外排实验中,缺氧HUVEC以芍药苷200μg/mL干预后细胞T1/2<30 min,显著低于正常给药组(P<0.05)。结论:芍药苷可有效改善eNOS、ET-1、TM、TF、tPA和PAI-1因子分泌,对HUVEC缺氧损伤具有保护作用;与正常细胞相比,缺氧模型组细胞对芍药苷摄取量较大,外排迅速。
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