Dickkopf相关蛋白3甲基化对直肠癌细胞生物学行为的影响及其临床意义

作者：杜芹^*; 王芳; 王贵娟; 孔庆丽; 李鹏; 刘鹏; 冯丽娜; 杨东

来源：中华实验外科杂志, 2022, 39(12).

• 直肠癌
• Dickkopf相关蛋白3
• 甲基化
• 生物学行为
• 临床意义

目的探讨Dickkopf相关蛋白3(DKK3)基因高甲基化对直肠癌增殖、迁移及侵袭的影响及其临床价值。方法 SW480、LOVO、HT29及HCT116等直肠癌细胞购自中国科学院细胞库。选择2016年1月至2016年12月直肠癌患者(直肠癌组)及直肠良性疾病患者(对照组)为研究对象。设计合成寡核苷酸序列(MON、UMON和CON)并转染至LOVO直肠癌细胞。采用甲基特异性PCR检测直肠癌患者(肿瘤组织、癌旁组织)、对照组直肠组织及直肠癌细胞系中DKK3基因甲基化状态;分析DKK3基因甲基化与临床病理因素、无进展生存期(PFS)及总生存期的关系;Transwell小室检测MON组、UMON组及CON组LOVO直肠癌细胞迁移及侵袭。两组间均数比较用独立样本t检验;多组间均数比较用单因素方差分析(组间比较用LSD-t检验)。Kaplan-Meier生存分析并采用Log-rank比较。结果直肠癌组患者肿瘤组织DKK3基因甲基化率显著高于癌旁组织及对照组直肠组织(甲基化率分别72.2%、11.1%比12.0%), 差异有统计学意义(χ2=88.756, P<0.05)。SW480、HT29及HCT116等直肠癌细胞系中DKK3基因呈甲基化状态, 而在LOVO直肠癌细胞中呈未甲基化状态。低+中分化、N2淋巴结转移、肿瘤最大径≥3 cm、T3+T4及Ⅲ+Ⅳ期患者DKK3基因甲基化率显著高于高分化、N0+N1淋巴结转移、肿瘤最大径<3 cm、T1+T2及Ⅰ+Ⅱ期患者(甲基化率分别79.31%比59.38%、86.11%比62.96%、83.67%比58.54%、83.33%比59.52%、82.76%比53.13%), 差异有统计学意义(χ2=5.922、4.673、5.833、5.198、7.610, 均P<0.05)。DKK3基因甲基化患者PFS及中位生存期显著低于DKK3基因未甲基化患者[PFS为(24.4±3.8)个月比(33.7±4.1)个月, 中位生存期为(31.5±4.2)个月比(42.8±5.4)个月], 差异有统计学意义(Log-rank=21.135、30.876, P<0.05)。MON组LOVO直肠癌细胞1～6 d细胞活力、细胞迁移数及侵袭数均显著高于UMON组及CON组LOVO直肠癌细胞[1 d的吸光度(A)值分别为0.21±0.03、0.14±0.03比0.15±0.04、2 d的A值分别为0.31±0.04、0.21±0.04比0.23±0.05、3 d的A值分别为0.42±0.05、0.29±0.05比0.28±0.06、4 d的A值分别为0.57±0.05、0.33±0.06比0.35±0.05、5 d的A值分别为0.71±0.08、0.45±0.06比0.44±0.07、6 d的A值分别为0.89±0.09、0.53±0.08比0.54±0.09, 细胞迁移数分别为(687.1±23.5)、(287.5±15.4)个比(285.9±15.1)个;细胞侵袭数分别为(419.6±34.2)、(151.7±14.9)个比(152.6±15.5)个], 差异有统计学意义(F=11.382、13.263、14.651、16.128、19.877、21.235、44.981、37.247, P<0.05)。结论 DKK3基因高甲基化可促进直肠癌细胞增殖、迁移及侵袭, 有助于直肠癌病情及预后评估。

• 单位
  济宁医学院附属医院