摘要
目的观察和比较不同浓度糖皮质激素(GC)对骨微血管内皮细胞(BMECs)和成骨细胞(OBs)活性和凋亡的影响。方法从Sprague-Dawley大鼠股骨中分离和培养BMECs和OBs, 通过血管性血友病因子(vWF)免疫荧光染色鉴定BMECs, 碱性磷酸酶(ALP)染色和茜素红S染色鉴定OBs。分别用0.0、0.1、0.2、0.3和0.4 mg/ml的GC处理细胞, 细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测BMECs和OBs的活性, 膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙锭(PI)染色和原位缺口末端标记法(TUNEL)/4’, 6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色检测BMECs和OBs的凋亡, SPSS 19.0进行数据分析。结果随着GC浓度逐渐升高, BMECs和OBs的活性呈剂量依赖性下降, 当GC=0.2 mg/ml时, BMECs活性为(74.511±3.109)%, OBs活性为(92.750±6.344)%, OBs活性高于BMECs(t=5.106, P<0.01)。0.2 mg/ml GC处理的BMECs凋亡率为(17.766±1.393)%, 与0 mg/ml组比较差异有统计学意义(t=17.150, P<0.01), 而0.2 mg/ml GC处理的OBs凋亡率为(4.932±0.616)%, 与0 mg/ml组比较差异无统计学意义(t=1.324, P>0.05)。当GC浓度=0.2 mg/ml时, BMECs的TUNEL阳性细胞比率为(18.765±1.393)%, OBs的TUNEL阳性细胞比率为(5.295±1.371)%, BMECs的TUNEL阳性细胞数高于OBs(t=13.784, P<0.01)。结论与OBs比较, GC可更明显地降低BMECs的活性和增加其凋亡。
- 单位