血管紧张素Ⅱ/乳脂肪球表皮生长因子8信号通路调控人脐静脉内皮细胞基质重构的作用及分子机制

作者：倪冷^*; 狄潇; 张锐; 马百涛; 刘昌伟; 郑曰宏

来源：中华实验外科杂志, 2021, 38(01).

• 脐静脉内皮细胞
• 血管紧张素Ⅱ
• 表皮生长因子8

目的探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)/乳脂肪球表皮生长因子8(MFG-E8)信号通路在人脐静脉内皮细胞(HUVECs)基质重构调控中的分子生物学机制。方法利用实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)实验对AngⅡ和MFG-E8浓度进行筛选, 根据实验需求在AngⅡ和MFG-E8浓度筛选实验中分为5组, 阴性对照组(DPBS)、AngII 0.1 μmol/L、AngII 1.0 μmol/L、MFG-E8 50.0 μg/L、MFG-E8 100.0 μg/L。并利用RT-qPCR和蛋白质印迹法(Western blot)检测AngⅡ和MFG-E8的相互作用关系及对下游基因单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响。两组间比较采用t检验, 多组间比较采用单因素方差分析, 组间两两比较采用SNK-q检验。结果在脐静脉内皮细胞中, 1 μmol/L的AngⅡ或100 μg/L MFG-E8能够促进AngⅡ mRNA的表达(1.62±0.30、2.25±0.36比1.00±0.00, t=3.606、6.015, P<0.05), 差异有统计学意义。0.1 μmol/L或1.0 μmol/L的AngⅡ(1.27±0.11、1.58±0.14比1.00±0.00, t=4.320、6.887, P<0.05), 以及50.0 μg/L或100.0 μg/L的MFG-E8能够促进MFG-E8的表达(1.90±0.09、2.77±0.07比1.00±0.00, t=17.240、43.130, P<0.05), 差异有统计学意义。通过AngⅡ刺激HUVECs细胞建立血管高压模型, 结果显示, AngⅡ能够显著促进HUVECs内AngⅡ、MFG-E8以及TGF-β1 mRNA的表达(1.62±0.13、4.27±0.47、1.56±0.11比1.00±0.00, t=7.911、12.060、8.710, P<0.01), 而AngⅡ受体拮抗剂洛沙钽能抑制AngⅡ的作用, AngⅡ与MFG-E8共处理, 则能进一步促进AngⅡ的作用(1.86±0.21比1.00±0.00, t=7.023, P<0.01), 显著协同促进MCP-1和MMP-2 mRNA的表达(1.69±0.25、1.69±0.15比1.00±0.00, t=4.735、7.845, P<0.01), 差异均有统计学意义。此外, AngⅡ能够显著促进MFG-E8蛋白水平的表达(0.23±0.01比0.16±0.03, t=3.895, P<0.05), 而洛沙钽能抑制AngⅡ对MFG-E8蛋白表达的促进作用, AngⅡ与MFG-E8共处理, 则能够进一步促进AngⅡ对MFG-E8(0.22±0.03比0.16±0.03, t=2.493, P<0.05)和TGF-β1蛋白水平表达的促进作用(0.66±0.06比0.50±0.03, t=3.870, P<0.01), 差异均有统计学意义。结论 AngⅡ能够促进MFG-E8的表达, 而MFG-E8也能够促进AngⅡ的表达, AngⅡ/MFG-E8信号通路能够促进基质重构标志物MCP-1、MMP-2和TGF-β1的表达。

• 单位
  中国医学科学院北京协和医学院; 北京协和医院