木聚糖酶基因的克隆与表达

作者：宋立立; 顿宝庆; 张亚楠; 田景汉

来源：江苏农业科学, 2018, 46(10): 43-46.

DOI：10.15889/j.issn.1002-1302.2018.10.011

• 木聚糖酶
• 基因克隆
• 基因表达
• 酶活性

用PCR技术从桔青霉基因组DNA反转录扩增得到木聚糖酶编码基因xyl,并构建基因表达载体p PAL7-xyl重组质粒,转化受体菌E.coli BL21进行原核表达分析。IPTG诱导6 h酶活性达到最高,为2.07 IU/m L;表达产物进行SDS-PAGE电泳分析,在22 ku处呈现蛋白条带,与理论的蛋白大小相一致,37℃条件下诱导6 h蛋白表达量最高;同时进行构建基因表达载体p PIC9K-xyl重组质粒,转化受体菌毕赤酵母GS115作真核表达分析,经甲醇诱导96 h后酶活性达到最高,为23.84 IU/m L。

• 单位
  生命科学学院; 中国农业科学院作物科学研究所; 沧州师范学院