Gstm3在何首乌苷延缓SH-SY5Y细胞衰老中的作用

作者：**静; 范芳; 陈佳瑜; 葛正龙^*

来源：遵义医科大学学报, 2022, 45(03): 296-303.

DOI：10.14169/j.cnki.zunyixuebao.2022.0061

• 何首乌
• 何首乌苷
• Gstm3
• 衰老
• 凋亡

目的 初步探讨Gstm3在何首乌苷延缓SH-SY5Y细胞衰老中的作用及可能机制。方法 从针对Gstm3基因的4组含不同shRNA序列的干扰载体中筛选沉默效率最高的一组，作为Gstm3沉默组(shGstm3-P/D),同时设空白对照组(NC-P/D,未转染)及阴性对照组(shNC-P/D,转染无意义的阴性对照病毒载体shRNA序列),对照组(NC组，SH-SY5Y细胞)、D-Gal处理组(D-Gal组，SH-SY5Y细胞用D-Gal处理)、何首乌苷和D-Gal共同处理组(P/D组，SH-SY5Y细胞用何首乌苷和D-Gal共同处理);采用qPCR检测SH-SY5Y细胞中Gstm3 mRNA水平，细胞端粒长短，CCK8法检测细胞活力；Western blotting检测转染后各组细胞Gstm3、Bax、Bcl-2蛋白的表达，流式细胞术检测转染后各组细胞凋亡率。结果 qPCR和WB检测结果显示，与NC组和shNC组比较shGstm3-P/D组SH-SY5Y细胞中Gstm3 mRNA和蛋白的表达明显降低(P<0.01);与NC组比较，D-Gal组端粒长度明显缩短，细胞活力下降；与D-Gal组比较，P/D组端粒长度明显增加，细胞活力升高；而与P/D组比较，shGstm3-P/D组端粒长度明显缩短，细胞活力明显下降(P<0.05);与NC-P/D组和shNC-P/D组比较，shGstm3-P/D组Bcl-2蛋白水平降低、Bax蛋白水平增加(P<0.05),且细胞凋亡率分别增加11.22%和9.07%(P<0.001)。结论 Gstm3通过调控细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达及细胞凋亡率参与何首乌苷延缓SH-SY5Y细胞衰老。

• 单位
  基础医学院; 遵义医科大学