肌肽抑制脂多糖诱导小胶质细胞炎症小体活化和细胞焦亡

作者：沈佳红; 温雨欣; 徐佳雯; 孙建良

来源：中国免疫学杂志, 2022, 1-10.

• 肌肽
• 脂多糖
• 小胶质细胞
• 炎症小体
• 细胞焦亡

目的：探讨肌肽对脂多糖（LPS）诱导小胶质细胞炎症小体活化和细胞焦亡的影响，初步阐明其作用机制。方法：建立LPS（10 ng/mL）诱导小胶质细胞活化模型，CCK-8法检测不同浓度（0.2、1、5、20、50 mmol/L）肌肽干预小胶质细胞6 h后的细胞活性和不同浓度肌肽预处理小胶质细胞0.5 h后再加LPS刺激6 h后的细胞活性，筛选药物浓度。筛选获得适宜肌肽浓度后将小胶质细胞分为对照组、肌肽组（5 mmol/L）、LPS模型组、LPS+肌肽组进行研究：倒置相差显微镜下观察各组细胞形态变化；ELISA法检测各组小胶质细胞培养基上清中白细胞介素1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素6（IL-6）水平；碘化丙啶（PI）染色法检测各组细胞焦亡情况；免疫荧光法检测各组小胶质细胞中NOD 样受体热蛋白结构域3（NLRP3）蛋白表达情况。结果：与对照组比较，LPS组小胶质细胞存活率明显降低（P<0.01），形态多呈“阿米巴状”激活态，小胶质细胞培养基上清中IL-1β、TNF-α、IL-6含量明显升高（P<0.01），PI阳性率和NLRP3阳性细胞数均明显增加（P<0.01）；与LPS组比较，LPS+肌肽组小胶质细胞存活率明显升高（P<0.01），“阿米巴状”激活态小胶质细胞数减少，培养基上清中IL-1β、TNF-α含量明显降低（P<0.01），IL-6含量降低（P<0.05），PI阳性率和NLRP3阳性细胞数均明显减少（P<0.01）。结论：肌肽可抑制LPS诱导小胶质细胞激活和炎症小体活化，进而抑制细胞焦亡和炎症因子释放。

• 单位
  浙江大学; 杭州市第一人民医院