奶牛精子RNA提取

作者：王惠娥; 孙献莹; 高庆华; 韩春梅; 沈波; 武延风

来源：中国畜牧兽医, 2011, (03): 80-84.

• 奶牛
• 精子
• 总RNA
• RT-PCR bovine
• sperm
• total RNA
• RT-PCR

优选3头公牛细管冻精,采用上游法获得纯化精子,以含体细胞污染的精子作对照,应用离心层析柱方法和Trizol一步法相结合提取总RNA,紫外分光光度计检测总RNA的D260/280值和产量,并对总RNA进行RT-PCR和凝胶电泳。结果显示,纯化的牛精子中不含体细胞,奶牛细管精液总RNA在2 h内完成提取,D260/280值为1.80,大于200 bp的总RNA产量为0.92μg/107个精子,精子总RNA进行RT-PCR,电泳后可得到清晰的SRY、LEP和RPS23基因3条带,不含18S rRNA基因条带。结果表明,离心层析柱法和Trizol一步法相结合可获得高质量的奶牛精子总RNA,且纯度和完整...

• 单位
  塔里木大学; 新疆生产建设兵团