ZM447439对乳腺癌细胞运动能力及凋亡的影响

作者：张月; 王耀一; 武雪亮; 张志生; 杨修明; 姜洋; 乔志飞; 梁晚平; 薛军^*

来源：山西医科大学学报, 2021, 52(05): 552-558.

DOI：10.13753/j.issn.1007-6611.2021.05.006

• 乳腺癌
• Aurora激酶
• Cofilin-1
• 细胞运动
• 凋亡

目的研究ZM447439对三阴性乳腺癌(TNBC) MDA-MB-231细胞运动能力和凋亡的影响及其作用机制。方法用不同浓度ZM447439处理MDA-MB-231细胞,MTT法检测细胞24,48 h增殖抑制率。PI染色流式细胞术检测多倍体细胞形成,免疫荧光检测细胞多核形成。AnnexinⅤ/PI双染流式细胞术观察不同浓度下ZM447439诱导MDA-MB-231细胞凋亡情况。Western blotting检测Cyclin B1和Aurora激酶,Histone H3,Cofilin-1,cdc25c,cdc2及其磷酸化水平的改变,凋亡相关蛋白Bcl-2,Bax,PARP的表达变化。划痕实验及趋化实验观察细胞迁移和趋化能力。结果不同浓度Aurora激酶抑制剂ZM447439(0,0.01,0.1,1,10μmol/L)处理MDA-MB-231细胞24 h后,细胞增殖抑制率分别为(1.21±0.01)%,(3.11±0.11)%,(19.27±0.17)%,(22.72±0.24)%和(62.23±0.03)%;不同浓度ZM447439 (0,0.01,0.1,1,10μmol/L)处理MDAMB-231细胞48 h后,细胞增殖抑制率分别为(3.45±0.02)%,(15.61±0.14)%,(39.35±0.25)%,(43.46±0.13)%和(84.17±0.01)%。流式细胞术结果显示,1μmol/L ZM447439作用于乳腺癌细胞48 h可观察到多倍体细胞,并且免疫荧光显示多核形成。0.1,1,10μmol/L ZM447439作用处理MDA-MB-231细胞后,与对照组(0μmol/L)相比,细胞凋亡率均明显升高[(17.4±2.2)%,(28.5±3.1)%,(51.8±5.4)%vs (0.6±0.2)%,P <0.05]。0,0.01,0.1,1,10μmol/L ZM447439处理细胞,随着药物浓度增加,磷酸化cdc25c,cdc2的表达逐渐增加,Cyclin B1、Aurora激酶及Cofilin-1的磷酸化表达逐渐减少,抗凋亡蛋白Bcl-2表达逐渐减少,促凋亡蛋白Bax、PARP蛋白剪切逐渐增加。与0μmol/L相比,0.01,0.1,1,10μmol/L ZM447439可显著延长划痕愈合时间,减少趋化穿膜细胞个数,差异均有统计学意义(P <0.05)。结论 ZM447439可通过抑制Aurora激酶及Cofilin-1磷酸化水平而抑制TNBC细胞增殖、运动,从而抑制侵袭及转移,诱导凋亡。

• 单位
  河北北方学院附属第一医院