基于细菌人工染色体的大基因质粒制备及应用研究

作者：游小燕^*; 吴梦; 刘雪芹; 何琦琳; 范骁玲

来源：基因组学与应用生物学, 2021, 40(01): 296-300.

DOI：10.13417/j.gab.040.000296

• 细菌人工染色体(BAC)
• 质粒
• 脉冲场电泳
• 酶切

细菌人工染色体(BAC)最多可克隆300 kb的DNA片段且遗传特性稳定,是目前常用的克隆载体。但如何高效提取BAC装载的大基因及其大基因操作等方面还需不断的摸索完善。本研究采用超大基因质粒提取法从BAC中提取出165 kb的大基因,经Nanodrop测定浓度、酶切、脉冲场电泳,表明获得目标基因;将获得的大基因质粒转染猪胎儿成纤维细胞,经抗性筛选,获得细胞克隆;克隆细胞经PCR检测,证明大基因质粒被完整地导入猪胎儿成纤维细胞。本研究为构建细菌人工染色体提够基础数据。

• 单位
  重庆市畜牧科学院