不同黏膜佐剂对猪丁型冠状病毒诱导小鼠免疫应答的影响

作者：李厚伟; 张先锋; 王彦辉; 姬星宇; 王蕾; 张真真; 李倩倩; 张云飞; 胡永浩^*

来源：微生物学报, 2022, 62(07): 2686-2701.

DOI：10.13343/j.cnki.wsxb.20210682

• 猪丁型冠状病毒
• 佐剂
• 黏膜免疫

【目的】旨在为猪丁型冠状病毒(porcine deltacoronavirus,PDCoV)灭活疫苗黏膜免疫筛选理想佐剂，降低疫苗副作用。利用小鼠模型评价不同佐剂制备的PDCoV灭活疫苗对体液免疫、细胞免疫和黏膜免疫应答的影响。【方法】将甘露聚糖肽(PA)、CpGODN2395、单磷酰脂质A(MPLA)佐剂分别与IMS 1313、GEL02佐剂联合制备PDCoV灭活疫苗，经鼻腔免疫BALB/c小鼠；将ISA201佐剂制备的PDCoV灭活疫苗经皮下免疫BALB/c小鼠，将PDCoV灭活抗原经鼻腔免疫BALB/c小鼠作为对照，间隔14 d加强免疫一次。用ELISA方法检测小鼠血清、支气管肺泡灌洗液(BALF)中的IgG、IgG1、IgG2a、IL-4、IFN-γ及粪便和BALF中sIgA表达水平；用MTT方法检测疫苗免疫后对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响；观察并记录小鼠免疫后的临床表现，HE染色方法观察免疫小鼠主要器官组织的病理学变化，评价疫苗的安全性。【结果】ISA201组小鼠BALF和血清中的抗体(IgG、IgG1)及IL-4表达水平相对较高，但IgG2a、IFN-γ和粪便中sIgA表达水平较低；相较于IMS 1313组、IMS1313+2395组、IMS1313+PA组、IMS1313+MPLA组，GEL02组、GEL02+2395组、GEL02+PA组、GEL02+MPLA组小鼠BALF和血清中的抗体(IgG、IgG1、IgG2a)、IL-4、IFN-γ及粪便中sIgA表达水平均较高；其中GEL02+2395组小鼠BALF和血清中IgG2a抗体、IFN-γ及BALF和粪便中sIgA表达水平显著高于其他组；GEL02+2395疫苗、IMS1313+2395疫苗可促进T淋巴细胞增殖；小鼠主要器官组织未见明显病理变化，GEL02疫苗、GEL02+2395疫苗免疫小鼠的副反应最轻微【。结论】GEL02与CpG ODN2395佐剂联合制备PDCoV灭活疫苗经鼻腔免疫小鼠，不仅可增强小鼠体液免疫水平，也可有效提高细胞免疫和黏膜免疫水平，为黏膜疫苗的研发提供数据支持。

• 单位
  河南农业大学; 甘肃农业大学