摘要
目的:研究真核载体介导的siRNA对人鼻咽癌CNE2细胞凋亡的影响。方法:真核质粒介导的针对STAT3基因siRNA转染人鼻咽癌细胞CNE2;RT-PCR、蛋白质印迹法、激光共聚焦显微镜、流式细胞术分别检测STAT3mRNA表达、STAT3、CyclinD1、Bcl-2和Bax蛋白表达以及细胞凋亡形态学改变、细胞周期和细胞凋亡。结果:转染72h后,与未转染组和阴性对照组相比,STAT3基因沉默组CNE2细胞中STAT3mRNA(P=0.000)和蛋白表达显著下降(P=0.000);Cyc-linD1和Bcl-2蛋白表达明显减少(P=0.000),Bax蛋白表达显著增多(P=0.000);Hoechst33258荧光染色可见核浓缩等典型细胞凋亡特征;细胞周期G1期比例明显增多〔分别为(80.09±2.37)%、(57.98±4.19)%和(61.85±2.31)%〕,P=0.000;凋亡率显著升高〔分别为(16.4±3.78)%、(3.20±1.74)%和(3.42±0.57)%〕,P=0.000。结论:STAT3基因沉默能有效地抑制鼻咽癌CNE2细胞中的STAT3表达,并通过调节CyclinD1、Bcl-2和Bax蛋白表达使鼻咽癌细胞阻滞于G1期,最终引致细胞凋亡。
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单位协和医院; 华中科技大学