基于PI3K/Akt/m TOR信号通路探讨玉屏风散对肥大细胞脱颗粒的影响

作者：韦薇; 覃骊兰; 李莉^*; 郑伟灏

来源：环球中医药, 2021, 14(09): 1580-1586.

• 玉屏风散
• 肥大细胞
• 脱颗粒活化
• PI3K/Akt/mTOR信号通路
• 过敏性疾病
• β-氨基己糖苷酶
• 白细胞介素
• 血小板激活因子

目的探讨玉屏风散及其有效组分抑制肥大细胞活化脱颗粒的过程是否与PI3K/Akt/m TOR信号通路相关。方法在体外用细胞计数CCK-8(cell counting kit-8)方法观察玉屏风散对P815肥大细胞是否有抑制其存活性的作用;用胰蛋白酶(1μg/m L)刺激P815肥大细胞的方法建立肥大细胞脱颗粒模型,收集细胞上清液,采用酶联免疫吸附法检测细胞上清液中β-氨基己糖苷酶(β-hexosaminidase,β-Hex)、组胺、白细胞介素(interleukin,IL)-4、IL-13、血小板激活因子(platelet activating factor,PAF)等相关细胞因子释放浓度变化;蛋白质印迹法(Western blot)检测相关蛋白磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinases,PI3K)、蛋白激酶B (protein kinase B,PKB/Akt)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,m TOR)及其磷酸化水平的表达;实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)检测PI3K、Akt、m TOR在mRNA水平上的表达量变化。结果玉屏风散浓度为25μg/m L以下时对细胞活性无明显抑制作用,在浓度为12.5μg/m L、25μg/m L时玉屏风散能有效抑制β-Hex、组胺的释放及IL-4、IL-13、PAF的分泌(P<0.05); Western blot结果显示玉屏风散有一定抑制PI3K、Akt、m TOR的磷酸化作用(P<0.05); qRT-PCR结果显示其能降低PI3K、Akt、m TOR的表达(P<0.05)。结论玉屏风散对肥大细胞脱颗粒活化的抑制作用可能是通过抑制PI3K/Akt/m TOR信号通路实现的。

• 单位
  广西中医药大学