人免疫球蛋白G酶解制备Fab和Fc片段及其分离纯化

作者：唐思远; 林东强; 童红飞; 姚善泾

来源：化工学报, 2013, (05): 1750-1756.

• 人免疫球蛋白G
• Fc片段
• Fab片段
• 木瓜蛋白酶
• 亲和色谱法
• 离子交换色谱法 human immunoglobulin G
• Fc fragment
• Fab fragment
• papain
• affinity chromatography
• ion exchange chromatography

为了制备抗体Fab和Fc片段,采用木瓜蛋白酶酶解人免疫球蛋白G(IgG),通过优化酶解条件和色谱法分离过程,得到了纯度较高的Fab片段和Fc片段。考察了酶解pH、酶加入量、添加半胱氨酸和酶解时间等对IgG酶解过程的影响,优化了酶解条件,提高酶解效率,IgG转化率大于98%。酶解产物通过Protein A亲和色谱法和DEAE阴离子交换色谱法进行了纯化,分离得到Fc片段和Fab片段,收率分别为72.6%和40.1%。经SEC-HPLC分析,Fc片段纯度达95.7%,Fab片段纯度达96.6%。

• 单位
  化学工程联合国家重点实验室; 浙江大学