摘要
目的:观察芪参汤对肝窦内皮细胞去分化及自噬的影响。方法:大鼠肝窦内皮细胞(LSEC)随机分为空白组、模型组、芪参汤低、中、高和抑制剂组,通过100μg/mL的氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)诱导24 h建模并给予相应的药物或血清进行干预。分别采用RT-qPCR及免疫荧光染色法检测VEGFR2及ET1的表达水平,透射电镜检测LSEC超微结构,ELISA法检测NO含量,Western blot法检测自噬相关蛋白(LC3BI、LC3BII和p62)及内皮细胞功能相关蛋白(eNOS及其磷酸化水平)的表达水平。结果:透射电镜结果显示,芪参汤含药血清能增加LSEC细胞中窗孔、自噬体的数量,抑制内皮下基底膜形成。与模型组相比,芪参汤含药血清能够明显上调LSEC中VEGFR2 mRNA及蛋白的表达水平,下调ET1 mRNA及蛋白的表达水平,差异均具有统计学意义(P<0.05)。此外,芪参汤还能明显增加LSEC中LC3BⅡ、p-eNOS、eNOS蛋白的表达和LC3BⅡ/LC3BI、p-eNOS/eNOS比值,降低LC3BI和p62蛋白的表达,与模型组比较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:芪参汤能够通过促进LSEC自噬水平抑制其去分化水平,进而发挥抗肝纤维化的作用。
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单位黑龙江省中医药科学院; 黑龙江中医药大学