科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
向日葵黑茎病菌是向日葵上的一种毁灭性真菌，是我国的植物检疫性有害生物。为了准确快速检测向日葵黑茎病菌，本研究根据向日葵黑茎病菌及其近似种的ITS序列差异，设计特异性RPA引物和CRISPR-Cas12a crRNA,建立了RPA等温扩增技术结合CRISPR-Cas12a检测的快速检测方法。通过条件优化，RPA/CRISPR-Cas12a检测体系在37℃恒温条件下，RPA反应30 min, CRISPR/Cas12a反应20 min,即可特异性检测向日葵黑茎病菌。荧光法检测灵敏度与实时荧光PCR的灵敏度相当，最低检测量为0.1 pg,试纸条法检测最低检测量为1 pg。由于试纸条检测结果可用肉眼观察，快速便携，操作简单，更适合用于田间和口岸的向日葵黑茎病菌快速早期检测；而荧光检测灵敏度高，对环境要求高，更适合用于实验室检测。
- 单位
