孕酮和骨化三醇通过miR-590-5p靶向RelA调控子宫内膜癌细胞Ishikawa的细胞因子分泌

作者：赵丽洁; 赵慧^*; 郭丹; 林丽红

来源：中国免疫学杂志, 2022, 38(11): 1343-1348.

• miR-590-5p
• 子宫内膜癌
• Ishikawa细胞
• 细胞因子
• 孕酮
• RelA
• 骨化三醇

目的：探讨孕酮和骨化三醇抑制子宫内膜癌细胞Ishikawa细胞因子分泌的分子机制。方法：孕酮和骨化三醇分别处理Ishikawa细胞，检测细胞因子IL-1β、TNF-α、CXCL1及CXCL2的mRNA水平，NF-κB亚基RelA、RelB、c-Rel、p50、p52蛋白水平。荧光素酶报告检测RelA启动子活性。高通量测序检测孕酮和骨化三醇处理Ishikawa细胞后miRNA表达差异。过表达孕酮和骨化三醇共同调控的差异miRNA，检测RelA表达。结果：孕酮和骨化三醇分别处理Ishikawa细胞后，细胞因子IL-1β、TNF-α、CXCL1、CXCL2分泌水平和表达均显著降低（P<0.05）,NF-κB亚基RelA表达下调，NF-κB亚基RelB、c-Rel、p50、p52表达无改变。孕酮和骨化三醇分别处理Ishikawa细胞，RelA启动子活性变化差异无统计学意义（P>0.05），但RelA mRNA水平降低（P<0.05）。孕酮和骨化三醇分别处理Ishikawa细胞后，有110种miRNAs表达上调，骨化三醇处理后有57种miRNAs表达上调，其中14种miRNAs两种处理后均上调。过表达两种处理后均上调的miRNAs，发现过表达miR-590-5p可降低NF-κB亚基RelA mRNA水平（P<0.05），且靶向NF-κB亚基RelA-3’端非编码区（P<0.05）。此外，过表达miR-590-5p后RelA蛋白水平下降，敲低后NF-κB亚基RelA蛋白水平上升。过表达miR-590-5p后，细胞因子IL-1β、TNF-α、CXCL1、CXCL2表达均显著降低（P<0.05），敲低后细胞因子IL-1β、TNF-α、CXCL1、CXCL2表达均显著升高（P<0.05）。但同时过表达或敲低miR-590-5p和RelA时，细胞因子IL-1β、TNF-α、CXCL1、CXCL2表达无明显变化（P>0.05）。结论：孕酮和骨化三醇处理Ishikawa细胞后miR-590-5p表达升高，miR-590-5p靶向NF-κB亚基RelA-3’端非编码区，降低RelA蛋白水平，降低NF-κB复合体活性，最终下调细胞因子IL-1β、TNF-α、CXCL1、CXCL2表达。本研究为孕酮和骨化三醇治疗子宫内膜癌的分子机制提供新依据，为孕酮和骨化三醇降低机体炎症反应提供理论依据。

• 单位
  安阳市肿瘤医院; 安阳职业技术学院