Ubc9基因重组腺病毒的构建及其在HeLa细胞中的表达

作者：李薇; 刘晓萍; 徐祥; 谭艳; 于业军; 李艳君; 任书亭; 贾跃伟

来源：中国医药生物技术, 2011, (03): 173-177.

• 腺病毒科
• HeLa细胞
• 基因表达
• 质粒 Adenoviridae
• Hela cells
• Gene expression
• Plasmids

目的构建携带Ubc9基因的重组腺病毒质粒pAdEasy-1/Ubc9,制备含Ubc9基因的重组腺病毒Ad-Ubc9,并使Ubc9在HeLa细胞中高效表达。方法 PCR法扩增目的Ubc9基因;用pemI酶切将穿梭质粒pAdTrack-CMV-Ubc9线性化;将线性化的穿梭质粒pAdTrack-CMV-Ubc9与腺病毒骨架质粒pAdeasy-1在感受态BJ5183菌内进行同源重组,筛选阳性重组子pAdEasy-1/Ubc9;再用PacI酶切pAdEasy-1/Ubc9使之线性化,线性化的重组腺病毒质粒经脂质体转染HEK293细胞,进行重组腺病毒的包装和扩增。收集重组腺病毒,感染HeLa细胞,用We...

• 单位
  中国人民解放军陆军军医大学; 青岛大学附属医院; 青岛大学